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產(chǎn)品詳情
簡(jiǎn)單介紹：
Origami(DE3)pLysS
詳情介紹：
感受態(tài)細(xì)胞基本信息
| 出品公司: | Novagen/ Millipore |
|---|---|
| 感受態(tài)細(xì)胞名稱: | Origami(DE3), Origami DE3, Origami-DE3 |
| 菌株類型: | E.coli |
| 產(chǎn)品貨號(hào): | 70628 |
| 培養(yǎng)基: | LB培養(yǎng)基 |
| 生長(zhǎng)條件: | 37 ℃, 有氧 |
| 基因型: |
 |
| 抗性: | 卡那，鏈霉素，四環(huán)素，氯霉素 |
| 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化條件: | 42 ℃熱激 |
| 應(yīng)用: | 蛋白表達(dá), 含二硫鍵蛋白表達(dá) |
| 誘導(dǎo)方法: | IPTG |
| 菌株特點(diǎn): |
Origami系列感受態(tài)細(xì)胞是K-12細(xì)胞的衍生而來(lái)，在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同時(shí)含有突變，這使得該菌株能夠更加高效的在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)生成二硫鍵，有助于含二硫鍵蛋白的活性蛋白形成。研究表明使用Origami系列的 感受態(tài)細(xì)胞表達(dá)獲得的活性二硫鍵蛋白比其他同類感受態(tài)細(xì)胞要多10倍左右。 Origami系列感受態(tài)細(xì)胞能夠用于氨芐抗性質(zhì)粒的蛋白表達(dá)，尤其是和pET32a載體能夠**搭配使用。pET32a載體含有thioredoxin (TRX)融合標(biāo)簽，能夠高效提升胞質(zhì)內(nèi)蛋白二硫鍵的形成。 TrxB和Gor基因突變使得質(zhì)粒能夠分別具有卡那和四環(huán)素抗性，所以本菌株無(wú)法用于卡那和四環(huán)素抗性質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。為了減少細(xì)胞內(nèi)多種分子間的二硫鍵的形成，含有TrxB和Gor基因突變的宿主菌被建議用于含二硫鍵正確折疊 蛋白的高效表達(dá)。 DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5啟動(dòng)子下攜帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝。該菌株適用于pET系列載體，及其他T7啟動(dòng)子系列載體。 含有pLSs質(zhì)粒，pLySs質(zhì)粒能夠產(chǎn)生T7溶菌酶，可以有效降低目的基因的基礎(chǔ)表達(dá)水平。pLySs質(zhì)粒使得該菌株具有氯霉素抗性。pLySs質(zhì)粒的起始復(fù)制位點(diǎn)是p15 Origin, 這使得該質(zhì)粒能夠和pUC-及pBR322-衍生的質(zhì)粒互相共存。 亮氨酸缺陷型菌株。 |